Проба с нагрузкой р-оксифенипировиноградной кислотой (тестацид) по Феликсу и Теске

Принцип. Проба основана на реакции Миллона. Интенсивность красного цвета, появившегося под влиянием оксифенила, измеряют фотометрически, и значения р-оксифенилпировиноградной кислоты вычисляют по соответствующей кривой.

Реактивы.

1. Реактив Миллона [15% раствор сернокислой ртути в 6 n серной кислоте; 75 г сернокислой ртути (II) прибавляют к 83 мл концентрированной серной кислоты, медленно добавляют 417 мл воды и, если полного растворения нет, подогревают на водяной бане].

2. 2% раствор азотистокислого натрия.

3. 2 n серная кислота (28 мл концентрированной серной кислоты в 472 мл дистиллированной воды).

Техника.

1. Налить по 2,5 мл мочи в две центрифужные пробирки емкостью по 15 мл, добавить по 2 мл реактива Миллона (1) и оставить стоять на 1 час.

2. Отцентрифугировать и слить с осадка в широкий низкий цилиндр емкостью 50 мл. Осадок в центрифужной пробирке взбаламутить небольшим количеством воды, снова отцентрифугировать и промывную воду добавить к раствору.

3. Подкислить раствор 10 мл 2 n серной кислоты (3) и поставить на 15 минут в кипящую водяную баню. По охлаждении добавить 10 мл 2 n серной кислоты (3) и оставить стоять на полчаса. После этого жидкости перенести пипеткой в мерные колбы вместимостью по 50 мл.

4. К одной из этих двух проб добавить 1 мл 2% раствора азотистокислого натрия (2), а другую пробу оставить для сравнения. Долить обе пробы водой до 50 мл и снова центрифугировать или фильтровать.

5. Раствор фотометрировать в ближайшие полчаса.

Толщина слоя: для нормальной мочи 2 — 3 см, для патологически измененной мочи 0,5 — 1 см. Процент пропускаемого света (Д) должен быть в пределах 50 — 70%. Фильтр S 50. Раствор для сравнения — приведенный под рубрикой 4 раствор, свободный от нитритов.

Расчет. Если работать с толщиной слоя в 1 см, то можно в нижеприведенной таблице получить выраженные в миллиграмм-процентах концентрации р-оксифенилпировиноградной кислоты, соответствующие указанной на барабане фотометра проводимости света, и перерасчитать на суточное количество. При работе с другой толщиной слоя надо раньше сделать расчет для слоя толщиной 1 см.

Таблица для определения концентрации р-оксифенилпировиноградной кислоты

д%	р-ОФПК	Д%	р-ОКПФ	д%	р-ОФПК	Д%	р-ОФПК
100	0,00	80	16,00	60	38,50	40	71,50
99	0,25	79	17,00	59	41,50	39	73,50
98	0,75	78	18,00	58	42,00	38	75,50
97	1,50	77	19,00	57	42,50	37	77,50
96	2,00	76	20,00	56	44,00	36	80,00
95	3,00	75	21,50	55	45,00	35	81,50
94	4,00	74	22,50	54	47,00	34	84,20
93	4,70	73	23,50	53	48,00	33	86,50
92	5,80	72	24,50	52	50,00	32	89,50
91	6,50	71	25,50	51	51,50	31	93,50
90	7,00	70	26,50	50	53,50	30	94,50
89	8,00	69	27,50	49	55,00	29	97,00
88	9,00	68	28,50	48	56,00	28	100,00
87	10,00	67	30,00	47	58,20	27	102,00
86	10,50	66	31,00	46	61,50	26	106,50
85	11,50	65	32,50	45	62,00	25	109,00
84	12,50	64	33,50	44	63,50	24	112,50
83	13,50	63	35,00	43	66,00	23	115,50
82	14,50	62	36,00	42	67,50	22	119,00
81	15,20	61	37,00	41	69,50	21	122,50

Примечание. р-ОФПК — р-оксифенилпировиноградная кислота; Д% — процент проводимости света.